心脏移植造模流程

小鼠/大鼠腹腔异位心脏移植模型构建技术详解

技术优势

成熟的显微外科技术,标准化的手术流程,确保模型质量稳定可靠

高成功率

手术成功率>98%,术后 7 天存活率>95%

标准化流程

严格无菌操作,规范化手术步骤,确保实验可重复性

专业病理评估

提供 HE 染色、Masson 染色、免疫组化等全套病理检测

完整数据记录

详细记录手术过程、术后观察、病理结果等关键数据

技术简介

心脏移植是免疫学研究、器官保存、排斥反应机制探索的关键模型。在小动物(小鼠、大鼠)上建立稳定、可重复的异位心脏移植模型,是进行移植免疫相关研究的重要方法。 目前小动物心脏移植主要有颈部套管法和腹腔手工缝合法两种。颈部套管法操作相对快捷,但套管容易导致血管狭窄、血供不良,且端端血压直接冲击会损伤移植心的主动脉瓣,具有一定的缺陷。 所以我们采用的腹腔手工缝合法,在腹主动脉和下腔静脉上进行端侧显微缝合,不仅更贴近临床心脏移植的真实操作,而且血管损伤小、术后搏动清晰可监测、长期存活率高,尤其适合移植免疫和慢性排斥反应研究。

常用实验动物品系与移植配对

小鼠品系(常用)

C57BL/6Balb/CDBA/2C3H

大鼠品系(常用)

LewisBrown Norway (BN)F344

经典移植配对示例

同系对照
C57BL/6 → C57BL/6
无排斥
同种急性排斥
C57BL/6 → BALB/c
完全错配,7–10 天排斥
大鼠经典模型
BN → Lewis
强烈急性排斥

手术流程(腹部手工缝合法)

标准化的五步手术流程,确保每一步都精准可控

1

供心获取

  • 供体麻醉、固定、备皮消毒
  • 开胸,暴露心脏及大血管
  • 预冷 4℃ UW 液或 Celsior 液灌注心脏
  • 结扎并离断主动脉、肺动脉、上腔静脉、肺静脉
  • 将供心置于 4℃保存液中修整:主动脉留 5–7mm 袖口,肺动脉留 3–5mm
  • 检查心脏是否完全排血、心肌颜色均匀
供心获取
2

受体准备

  • 受体麻醉、仰卧固定,腹部正中开腹
  • 暴露腹主动脉及下腔静脉
  • 用显微血管夹阻断血流
受体准备
3

主动脉端侧吻合

  • 在腹主动脉上做约 1–2mm 纵行切口
  • 用 10-0 缝线将供体主动脉与受体腹主动脉连续缝合
主动脉端侧吻合
4

肺动脉端侧吻合

  • 下腔静脉前方做切口
  • 供体肺动脉与受体下腔静脉吻合
  • 开放血流前,轻柔排空气体
肺动脉端侧吻合
5

恢复血供与关腹

  • 开放血管夹,观察心脏由苍白→红润→自主跳动
  • 关腹
恢复血供与关腹

病理学评估

专业的病理切片染色与图像分析,客观评估移植心脏组织学变化

T细胞介导的急性排斥反应 (HE 染色)

T细胞介导的急性排斥反应 (HE 染色)

心肌间质大量淋巴细胞浸润,心肌纤维断裂、坏死。

抗体介导的急性排斥反应 (C4d染色)

抗体介导的急性排斥反应 (C4d染色)

毛细血管可见线性C4d阳性着色。

慢性排斥反应 (Masson 染色)

慢性排斥反应 (Masson 染色)

心肌间质纤维化明显,胶原沉积增加,血管壁增厚。

免疫组化 CD8 染色

免疫组化 CD8 染色

CD8+ T 淋巴细胞浸润,提示细胞免疫反应激活。

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